摘要：2018年5月3日，國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布了國家藥品監(jiān)督管理局于2018年1月5日發(fā)布了《動物源性醫(yī)療器械注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》（2017年修訂版）,要求動物源性醫(yī)療器械產(chǎn)品注冊申報資料在滿足一般性要求的基礎(chǔ)上，還需在研究資料、風(fēng)險分析資料、產(chǎn)品技術(shù)要求及產(chǎn)品說明書等技術(shù)性文件中增加證明安全性的相關(guān)內(nèi)容。相對于2009年發(fā)布的《指導(dǎo)原則》，新修訂的《指導(dǎo)原則》明確了開展動物源性醫(yī)療器械免疫原性研究、評價與控制的原則、流程和方法，且細(xì)化了動物源性醫(yī)療器械病毒滅活/去除有效性驗(yàn)證的原則，病毒滅活/去除工藝有效性的判斷標(biāo)準(zhǔn)更加嚴(yán)格和嚴(yán)謹(jǐn)。以下是《指導(dǎo)原則》的詳細(xì)內(nèi)容。

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對動物源性醫(yī)療器械的注冊申報資料進(jìn)行準(zhǔn)備。某些醫(yī)療器械可能含有動物來源的材料，這些材料是多種多樣的，可以構(gòu)成該器械的主要部件（例如牛/豬源心臟瓣膜、羊腸縫合線、止血材料等）、涂層或者浸滲劑（例如肝素、明膠、膠原等），也可成為生產(chǎn)過程中所用的輔助材料（例如牛脂等）。動物組織及其衍生物的使用可能會比非生物來源的材料（例如金屬、塑料以及織物等）使醫(yī)療器械具有更好的性能，但是在另一方面，它們應(yīng)用到人體則又會增加病毒傳播和免疫原性等方面的安全風(fēng)險，且存在材料表征上的困難，因此對于動物源性醫(yī)療器械安全性的評價，需要考慮比常規(guī)醫(yī)療器械更多方面的內(nèi)容。如果注冊申請人在準(zhǔn)備醫(yī)療器械注冊申報資料時有上述考慮，將有助于更加充分、科學(xué)地評價醫(yī)療器械產(chǎn)品的風(fēng)險受益比。

本指導(dǎo)原則是在注冊申報資料中有關(guān)的技術(shù)性文件（研究資料、風(fēng)險分析資料、產(chǎn)品技術(shù)要求及產(chǎn)品說明書）滿足一般性要求的基礎(chǔ)上，針對動物源性醫(yī)療器械產(chǎn)品的特點(diǎn)提出的需特別關(guān)注和增加論述的內(nèi)容要求。此外，注冊申請人還應(yīng)按照《醫(yī)療器械注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第4號）、《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）、《關(guān)于公布醫(yī)療器械注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第43號）以及總局發(fā)布的其他相關(guān)文件要求并參考YY/T 0771/ISO 22442系列標(biāo)準(zhǔn)等技術(shù)性文件提交注冊申報資料。注冊申請人應(yīng)當(dāng)依據(jù)具體產(chǎn)品的特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用。若不適用，應(yīng)詳細(xì)闡述其理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)。注冊申請人還應(yīng)依據(jù)具體產(chǎn)品的特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是對注冊申請人和醫(yī)療器械相關(guān)管理部門技術(shù)審評人員的指導(dǎo)性文件，不限制相關(guān)管理部門對該類產(chǎn)品的技術(shù)審評以及注冊申請人對注冊申報資料的準(zhǔn)備工作。本指導(dǎo)原則不包括注冊審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制訂的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將進(jìn)行適時的調(diào)整。

本指導(dǎo)原則為2009年發(fā)布的《動物源性醫(yī)療器械產(chǎn)品注冊申報資料指導(dǎo)原則》的修訂版。主要修訂內(nèi)容包括：根據(jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例》及配套規(guī)章調(diào)整了指導(dǎo)原則的結(jié)構(gòu)、各級標(biāo)題和相關(guān)內(nèi)容；增加了動物源性醫(yī)療器械免疫原性研究、評價與控制的原則；細(xì)化了動物源性醫(yī)療器械病毒滅活/去除有效性驗(yàn)證的原則并將之由正文調(diào)整至附錄；調(diào)整了病毒滅活/去除工藝有效性判斷的標(biāo)準(zhǔn)等。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于全部或部分采用動物組織制成的或取材于動物組織的醫(yī)療器械產(chǎn)品（體外診斷用醫(yī)療器械除外）的注冊申報。本指導(dǎo)原則同樣適用于采用動物組織衍生物或由動物體自然獲取物質(zhì)（例如：牛奶、羊毛等）制成的醫(yī)療器械產(chǎn)品注冊申報。

二、基本要求

動物源性醫(yī)療器械的產(chǎn)品注冊申報資料在滿足一般性要求的基礎(chǔ)上，還需增加下述內(nèi)容：

（一）研究資料

對于動物源性醫(yī)療器械，研究資料需增加涉及控制病毒和/或傳染性因子感染以及免疫原性風(fēng)險方面有關(guān)的技術(shù)內(nèi)容。

鑒于不同種類和不同數(shù)量的病毒和/或傳染性因子感染人體的概率不盡相同，而不同動物種類易感染病毒和傳染性因子的種類和程度也千差萬別，因此動物種類的確定對于動物源性醫(yī)療器械的風(fēng)險評價起著重要作用。此外，動物的地理來源、年齡、取材部位、組織類型的不同也直接影響著動物源性材料所具有風(fēng)險的高低。

對于感染病毒和傳染性因子的風(fēng)險控制需至少從源頭控制和工藝過程控制兩方面著手，僅依靠源頭控制或僅依靠工藝過程控制都無法確保風(fēng)險降至最低。為確保風(fēng)險的可控性，企業(yè)應(yīng)按照醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的相關(guān)要求在生產(chǎn)質(zhì)量體系中建立一套專門針對動物源性風(fēng)險因素的控制和追溯體系。在動物源性材料或醫(yī)療器械的生產(chǎn)工藝中需考慮設(shè)置病毒滅活/去除的相關(guān)步驟。這些步驟可以借用生產(chǎn)過程中已有的工藝步驟。如果已有的生產(chǎn)工藝不能滿足病毒滅活/去除的要求，則需額外增加適宜的病毒滅活/去除步驟。企業(yè)需要充分考慮該步驟對醫(yī)療器械產(chǎn)品性能的影響。

為降低動物源性材料的免疫原性風(fēng)險，一般需在生產(chǎn)工藝中采取相應(yīng)處理措施以降低其免疫原性，如脫細(xì)胞處理、提純，以及采用其他物理或化學(xué)方法對具有潛在免疫原性的物質(zhì)（如核酸、蛋白、多糖、脂質(zhì)和其他小分子物質(zhì)等）進(jìn)行去除或?qū)ζ淇乖砦贿M(jìn)行消除/隱藏。生產(chǎn)企業(yè)需對其降低材料免疫原性的有效性進(jìn)行驗(yàn)證。然而，這些處理措施以及滅活和去除病毒和/或傳染性因子的處理步驟有可能是以犧牲材料本身的使用性能或增加新的風(fēng)險為代價的，生產(chǎn)企業(yè)需充分評估其對產(chǎn)品的不利影響，以保證產(chǎn)品最終能夠安全有效地使用。

因此，研究資料至少需增加以下內(nèi)容：

1.動物的種屬（若風(fēng)險與品系有關(guān)還需明確品系）、地理來源（對于無法確定地理來源的種屬，宜提供來源動物生存期間的識別與追溯信息）、年齡（與風(fēng)險有關(guān)時適用，例如動物對自然發(fā)生的傳播性海綿狀腦病的易感性）、取材部位和組織的類型、動物及取材組織健康狀況的具體描述；

2.對生產(chǎn)過程中滅活和去除病毒和/或傳染性因子工藝過程的描述及有效性驗(yàn)證數(shù)據(jù)或相關(guān)資料（滅活和去除病毒驗(yàn)證的原則見附錄1）；

3.對降低動物源性材料免疫原性的方法和/或工藝過程的描述、質(zhì)量控制指標(biāo)與驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)或相關(guān)資料（免疫原性研究、評價與控制的原則見附錄2）。

（二）風(fēng)險分析資料

對于動物源性醫(yī)療器械，這一部分的資料需要增加對病毒和/或傳染性因子感染以及免疫原性風(fēng)險的分析、控制以及殘余風(fēng)險的分析。

鑒于使用動物源性材料所帶來的潛在風(fēng)險，注冊申請人需具體說明在所申報的醫(yī)療器械中使用動物源性材料同使用非動物源性材料相比具有哪些優(yōu)勢，以便充分評價使用動物源性材料的風(fēng)險/受益比。

對于不同的動物源性醫(yī)療器械，其免疫原性風(fēng)險也會因取材動物的種類、取材部位的不同而不同，因此需在充分分析免疫原性風(fēng)險的基礎(chǔ)上再對其進(jìn)行有效的控制。

對感染病毒和/或傳染性因子的風(fēng)險分析需包括動物的飼養(yǎng)、運(yùn)輸、屠宰，動物源性材料的取材、加工處理，以及動物源性醫(yī)療器械在人體的使用等各個環(huán)節(jié)。

因此，產(chǎn)品風(fēng)險分析報告需至少增加以下內(nèi)容：

1.使用動物源性材料的依據(jù)以及動物源性材料與其他材料的比較分析，對于所用動物源性材料未使用其他材料進(jìn)行替代的風(fēng)險/受益分析；

2.對動物在飼養(yǎng)過程中可能感染病毒和/或傳染性因子的風(fēng)險分析（包括飼養(yǎng)方式、飼養(yǎng)條件、動物源性蛋白質(zhì)飼料的使用情況、防疫情況、運(yùn)輸?shù)确矫妫┖拖鄳?yīng)的控制措施；

3.對取材和加工處理等過程中產(chǎn)品可能感染病毒和/或傳染性因子的風(fēng)險分析和相應(yīng)的控制措施；

4.對產(chǎn)品使用過程中人體可能由動物源性醫(yī)療器械感染病毒和/或傳染性因子的風(fēng)險分析和相應(yīng)的控制措施；

5.對產(chǎn)品使用過程中人體可能因?yàn)榻佑|動物源性材料而產(chǎn)生的免疫原性方面的風(fēng)險分析和相應(yīng)的控制措施。

注：該項(xiàng)內(nèi)容可按照YY/T 0771/ISO 22442提供。

（三）產(chǎn)品技術(shù)要求

注冊申請人需在產(chǎn)品技術(shù)要求中制定出終產(chǎn)品免疫原性相關(guān)性能的控制指標(biāo)，這些控制指標(biāo)一般是通過體外試驗(yàn)測定的能夠間接地反映產(chǎn)品免疫原性得到有效控制的終產(chǎn)品的性能指標(biāo)，例如殘留DNA含量、殘留抗原含量、殘留雜蛋白含量等（基于風(fēng)險分析，根據(jù)不同情況選擇適宜的指標(biāo)）。若產(chǎn)品的免疫原性風(fēng)險主要取決于生產(chǎn)過程控制，且用于控制免疫原性的性能指標(biāo)所涉及的體外試驗(yàn)無法針對終產(chǎn)品進(jìn)行操作，則需在研究資料中提供中間品的相關(guān)控制資料。

產(chǎn)品性能研究資料中需提供制定上述控制指標(biāo)具體限值及檢測方法的科學(xué)依據(jù)以證明產(chǎn)品的免疫原性可以控制在可接受范圍（可以依據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、文獻(xiàn)數(shù)據(jù)、與已上市產(chǎn)品的對比和/或免疫毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行提供）。

（四）產(chǎn)品說明書

出于對患者知情權(quán)的考慮，需在產(chǎn)品說明書中明示出產(chǎn)品取材于何種動物的何種組織。

三、其他需要注意的問題

1.對于由動物組織的衍生物或天然獲取的物質(zhì)（如殼聚糖、蠶絲、蜂蠟等）制成的醫(yī)療器械，也需參照此指導(dǎo)原則。對于一些可能不直接適用的條款，注冊申請人需進(jìn)行相應(yīng)說明，闡述不適用的理由。

2.對于某些組成成分中不含動物組織或其衍生物，但在生產(chǎn)過程中使用或接觸了本指導(dǎo)原則所包括的動物源性材料的醫(yī)療器械（如在采用微生物發(fā)酵法制備透明質(zhì)酸鈉的過程中使用了含動物源成分的培養(yǎng)基），原則上也需提交相應(yīng)的風(fēng)險分析和控制措施，以及相關(guān)的驗(yàn)證數(shù)據(jù)或資料。

3.對于通常情況下不用于醫(yī)療器械方面的動物種類需提供該物種適合用于人體使用的相關(guān)研究資料。

4.對于YY/T 0771.1 / ISO 22442-1《動物源醫(yī)療器械 第1部分：風(fēng)險管理應(yīng)用》附錄中提到的動物脂衍生物、動物炭和氨基酸，若證明其處理過程符合YY/T 0771.1 / ISO 22442-1 附錄中的相關(guān)要求，則可不再提交其處理過程的病毒去除/滅活有效性驗(yàn)證研究資料。

四、名詞解釋

動物：除人類以外的脊椎動物或無脊椎動物［包括兩棲動物、節(jié)肢動物（如甲殼綱動物）、鳥類、珊瑚蟲、魚類、爬行動物、軟體動物和哺乳動物等］。

衍生物：通過制造工藝從動物材料中獲得的物質(zhì)。例如：透明質(zhì)酸、膠原、明膠、單克隆抗體、殼聚糖、白蛋白。

傳染性因子：細(xì)菌、霉菌、酵母菌、寄生蟲、病毒、TSE因子以及未被分類的病原體。

去除：使病毒和傳染性因子的數(shù)量減少的過程。

滅活：降低病毒和/或傳染性因子引起感染或者致病反應(yīng)能力的過程。

五、參考文獻(xiàn)

1.《醫(yī)療器械注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第4號）

2.《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）

3.《關(guān)于公布醫(yī)療器械注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第43號）

4. YY/T 0771.1-2009/ISO 22442-1:2015《動物源醫(yī)療器械 第1部分：風(fēng)險管理應(yīng)用》

5. YY/T 0771.2-2009/ISO 22442-2:2015《動物源醫(yī)療器械 第2部分：來源、收集與處置的控制》

6. YY/T 0771.3-2009/ISO 22442-3:2007《動物源醫(yī)療器械 第3部分：病毒和傳播性海綿狀腦?。═SE）因子去除與滅活的確認(rèn)》

7. YY/T 0771.4-2015/ISO 22442-4:2010《動物源醫(yī)療器械 第4部分：傳播性海綿狀腦?。═SE）因子的去除和/或滅活及其過程確認(rèn)分析的原則》

8.《血液制品去除/滅活病毒技術(shù)方法及驗(yàn)證指導(dǎo)原則》（國藥監(jiān)注〔2002〕160號）

9. YY/T 0606.25-2014《組織工程醫(yī)療產(chǎn)品 第25部分：動物源性生物材料DNA殘留量測定法：熒光染色法》

10. ISO/TS 10993-20:2006 Biological evaluation of medical devices Part 20: Principles and methods for immunotoxicology testing of medical devices

11. Stephen F. Badylak and Thomas W. Gilbert. Immune Response to Biologic Scaffold Materials. Semin Immunol. 2008 April；20（2）: 109-116.

六、起草單位

國家食品藥品監(jiān)督管理總局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心

附錄：1.動物源性醫(yī)療器械病毒滅活/去除有效性驗(yàn)證的原則

2.動物源性醫(yī)療器械免疫原性研究、評價與控制的原則

附錄1

動物源性醫(yī)療器械病毒滅活/去除

有效性驗(yàn)證的原則

為了提高動物源性醫(yī)療器械的安全性，生產(chǎn)過程中需存在特定的滅活/去除病毒工藝步驟。為確認(rèn)這些工藝步驟對于滅活/去除病毒的有效性，需進(jìn)行相應(yīng)的驗(yàn)證工作。

注：關(guān)于進(jìn)行滅活和去除病毒和/或傳染性因子工藝有效性驗(yàn)證的驗(yàn)證機(jī)構(gòu)的資質(zhì)要求需遵循相應(yīng)的法規(guī)?？紤]到某些病毒可能會對從事驗(yàn)證研究的人員造成健康危害，宜考慮采取適宜的保護(hù)措施。

對這些工藝的滅活/去除病毒有效性的驗(yàn)證，需至少遵循以下原則：

一、驗(yàn)證研究的設(shè)計

1.病毒滅活/去除有效性驗(yàn)證研究通常是將已知量的指示用活病毒，加入到待驗(yàn)證的工藝步驟處理前的模擬原材料或中間品中，然后定量測定經(jīng)工藝步驟處理后指示病毒數(shù)量下降的幅度，由此評價生產(chǎn)工藝的去除/滅活病毒效果。需合理設(shè)計與實(shí)際生產(chǎn)工藝相關(guān)的病毒去除/滅活研究試驗(yàn)方案。一般只對可能或預(yù)期具有病毒去除/滅活效果的工藝步驟進(jìn)行驗(yàn)證，不必對每個生產(chǎn)工藝步驟都進(jìn)行驗(yàn)證。

為達(dá)到有效地去除/滅活效果，生產(chǎn)工藝中通常會聯(lián)合使用滅活與去除步驟，甚至多個從機(jī)制上能夠互補(bǔ)的去除和/或滅活步驟。如果產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝中包含了采用不同病毒去除/滅活方法（這里指不同機(jī)制的方法）的滅活/去除工藝步驟，需對這些步驟分別進(jìn)行病毒去除/滅活效果驗(yàn)證。每一滅活/去除工藝步驟的病毒降低系數(shù)計算公式如下：

降低系數(shù) R = log₁₀ [（V₁×T₁）/（V₂×T₂）]

其中，V₁為步驟開始前材料的體積，V₂為步驟完成后的材料的體積，T₁為步驟開始前材料中的指示病毒滴度，T₂為步驟完成后材料中的指示病毒滴度。

注意：降低系數(shù)計算時要基于樣品中可檢測的指示病毒量，而不是基于所加入的指示病毒量。

2.為避免將任何病毒人為的引入實(shí)際生產(chǎn)設(shè)施，驗(yàn)證工作應(yīng)在單獨(dú)的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，因此通常采用縮小規(guī)模的生產(chǎn)工藝來模擬實(shí)際生產(chǎn)工藝。采用縮小規(guī)模生產(chǎn)工藝的方法，需盡可能模擬真實(shí)生產(chǎn)過程，按照能代表去除和/或滅活病毒能力最差情況的條件進(jìn)行設(shè)計。需分析生產(chǎn)工藝中各種參數(shù)的偏差對病毒去除/滅活效果的影響。

3.病毒滅活/去除的有效性同材料的結(jié)構(gòu)、尺寸和形狀以及病毒在材料中的分布有關(guān)，在研究設(shè)計中宜對此予以考慮。當(dāng)驗(yàn)證樣品為固體材料時，需盡量模擬生物材料的病毒負(fù)載方式，使負(fù)載指示病毒充分而且均勻地浸入到材料的內(nèi)部。若此法不可行，則需盡可能采用對于去除/滅活效果更為不利的指示病毒負(fù)載方式。

4.要獲得對每個滅活/去除工藝步驟的準(zhǔn)確評價，必須保證每個步驟在起始時加入了足夠多的指示病毒負(fù)載量。然而，所加入的指示病毒懸液的體積不宜超過試驗(yàn)樣品總體積的10%，以使試驗(yàn)樣品在成分方面與生產(chǎn)材料保持相近。

5.如果可能，含有指示病毒的試驗(yàn)樣品除所驗(yàn)證的病毒滅活/去除步驟之外不宜再經(jīng)過進(jìn)一步的處理（如超速離心、透析）或儲存而直接進(jìn)行檢測。在進(jìn)一步處理或儲存無法避免時，宜采用適當(dāng)?shù)膶φ?，以確定這些處理和儲存過程對研究結(jié)果的影響。需詳細(xì)說明樣本制備及驗(yàn)證試驗(yàn)的過程并論證其合理性。

6.所采用的病毒定量檢測分析方法需具有充分的靈敏度和可重復(fù)性，需設(shè)計適宜的重復(fù)樣本試驗(yàn)和對照，以確保結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義上足夠的精確性（同一檢測方法內(nèi)樣本組內(nèi)和組間差異的95%可信限宜達(dá)到±0.5log以內(nèi)，否則需對檢測結(jié)果的可信度進(jìn)行充分的論證）。需考慮研究材料中的某些特殊成分可能會對檢測的準(zhǔn)確度造成干擾，盡量設(shè)計采取相應(yīng)措施避免這些干擾。若無法避免，必要時需對干擾進(jìn)行定量評估。若采用感染性病毒檢測以外的其他方法進(jìn)行病毒測定，需提供充分的論證依據(jù)和理由。

7.滅活研究宜設(shè)計為在不同的時間點(diǎn)（包括零時）采樣，從而建立滅活動力學(xué)曲線。

8.在進(jìn)行去除研究時，如生產(chǎn)工藝中去除病毒的原理是通過將病毒分離為沉淀物或去除某些組分來降低病毒的感染性，則需對被除去的樣品也進(jìn)行研究。宜盡可能給出病毒在不同部分間的對比分布。

二、指示病毒的選擇

首先，需要選擇與實(shí)際生產(chǎn)用的動物源性材料中可能含有的病毒種類相關(guān)的指示病毒，不能用相關(guān)病毒的，要選擇與其理化性質(zhì)盡可能相似的指示病毒；第二，所選擇的指示病毒理化性質(zhì)需有代表性（病毒大小、核酸類型以及有無包膜），其中至少需包括一種對生產(chǎn)工藝所涉及的物理和/或化學(xué)處理有明顯抗性的病毒；第三，指示病毒初始滴度需要盡可能高（一般需≥10⁶/mL）。

表1列舉了已用于病毒滅活/去除研究的指示病毒。病毒的耐受性與特定的處理方式有關(guān)，只有在了解病毒生物特性和生產(chǎn)工藝特定情況下才能使用這些病毒，而且實(shí)際結(jié)果會隨著處理情況的變化而變化。

表1  已用于病毒滅活/去除研究的指示病毒舉例

三、效果的判定

對于病毒去除/滅活效果的判斷，應(yīng)考慮同時達(dá)到以下兩個要求：

（一）去除/滅活降低系數(shù)的要求

病毒去除/滅活有效性驗(yàn)證的目的是為了確定生產(chǎn)工藝去除/滅活病毒的能力，因此需獲得生產(chǎn)全過程中估計去除/滅活病毒的總降低系數(shù)。一般每種指示病毒的總降低系數(shù)為各步驟降低系數(shù)的總和。但是由于驗(yàn)證方法的局限性，如分步驟中指示病毒降低系數(shù)≤1 log，則不宜將其計算在總量中。在分析試驗(yàn)結(jié)果時需注意，如果將多步驟的去除/滅活病毒降低系數(shù)相加（特別是將去除/滅活效果不明顯的步驟相加）或者將工藝過程中重復(fù)采用的同樣或者類似去除/滅活機(jī)制形成的去除/滅活效果累加，可能會高估工藝實(shí)際能達(dá)到的效能。需考慮有效步驟對指示病毒的去除/滅活效果可能與實(shí)際生產(chǎn)工藝中使用的效果有一定偏差。

一般來說，醫(yī)療器械的生產(chǎn)過程中去除/滅活病毒的總降低系數(shù)宜達(dá)到6 logs以上（即病毒數(shù)量下降到進(jìn)行去除/滅活前數(shù)量的百萬分之一以下），并且原則上需至少有一個病毒去除/滅活步驟的降低系數(shù)達(dá)到4 logs以上（如因檢測方法的靈敏度造成檢測出的病毒降低系數(shù)接近但小于4 logs時，應(yīng)盲傳三代，如無病毒檢出，亦可認(rèn)為是有效地去除/滅活病毒步驟）。如果采用總降低系數(shù)達(dá)6 logs的病毒滅活/去除工藝將導(dǎo)致醫(yī)療器械產(chǎn)生不可接受的性能改變，則需要根據(jù)動物源性材料的來源、采集及處理過程控制情況以及對患者的風(fēng)險/受益分析來判斷其可接受性，但其單一去除/滅活病毒步驟的降低系數(shù)仍需達(dá)到4 logs以上。

即使驗(yàn)證研究證明了去除/滅活病毒工藝的有效性，這僅說明動物源性材料中殘留病毒的感染性大幅度降低，但其數(shù)值永遠(yuǎn)不可能降至零。

（二）病毒滅活動力學(xué)要求

評價驗(yàn)證結(jié)果不能僅考慮病毒降低量，同時也要考慮病毒滅活動力學(xué)。需以作圖的形式報告滅活動力學(xué)驗(yàn)證結(jié)果。如果指示病毒殘留量很快降到最低檢出限度值，則說明此方法滅活病毒效果較好；如果指示病毒滅活速率緩慢，在滅活結(jié)束時才達(dá)到最低檢出限度值，則不能認(rèn)為是一個有效的病毒滅活方法。

四、關(guān)于朊蛋白

由于目前尚難以采用致病性朊蛋白（如傳染性海綿狀腦病因子）的指示因子對去除朊蛋白的工藝進(jìn)行驗(yàn)證，因此對牛、羊源性材料制品的傳染性海綿狀腦病安全性還主要是對源頭進(jìn)行控制?；谀壳皩﹄玫鞍兹コ?滅活工藝驗(yàn)證的認(rèn)知程度，對于牛、羊源性醫(yī)療器械，可以接受按照本附錄第一、二、三條闡述的原則所進(jìn)行的病毒去除/滅活有效性驗(yàn)證。隨著對朊蛋白研究水平的不斷提高，相應(yīng)的要求也將隨時調(diào)整。

附錄2

動物源性醫(yī)療器械免疫原性研究、

評價與控制的原則

關(guān)于對動物源性醫(yī)療器械免疫原性的研究、評價與控制是建立在對產(chǎn)品免疫原性風(fēng)險分析的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，是動物源性醫(yī)療器械風(fēng)險管理的一個組成部分。動物源性醫(yī)療器械免疫原性的研究、評價與控制資料主要包括：免疫原性毒理學(xué)/臨床相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)資料、免疫毒理學(xué)試驗(yàn)資料、免疫原性風(fēng)險相關(guān)的質(zhì)量控制資料以及免疫原性相關(guān)不良事件資料等。免疫原性研究、評價與控制的流程見圖1。

一、免疫原性毒理學(xué)/臨床相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)

免疫原性毒理學(xué)/臨床相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)主要包括類似產(chǎn)品或材料作用于人體引發(fā)免疫應(yīng)答的途徑、發(fā)生免疫反應(yīng)的種類、程度和可能性以及已報道的免疫毒理學(xué)數(shù)據(jù)等。引用文獻(xiàn)時需注意文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的可靠性和與申報產(chǎn)品的相關(guān)性，并提供文獻(xiàn)文本。

二、免疫毒理學(xué)試驗(yàn)

注冊申請人可根據(jù)申報產(chǎn)品與已在境內(nèi)上市產(chǎn)品在免疫原性影響因素（包括動物種類、取材組織、處理工藝原理、與人體接觸方式等）上的可比性和免疫原性風(fēng)險評價相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的充分性決定是否進(jìn)行免疫毒理學(xué)試驗(yàn)。如申報產(chǎn)品免疫原性風(fēng)險與已上市產(chǎn)品無可比性，且無充分的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)評價其免疫原性，則需進(jìn)行免疫毒理學(xué)試驗(yàn)。免疫毒理學(xué)試驗(yàn)可按照YY/T 16886.20/ISO 10993-20進(jìn)行。

注：在按照ISO 10993-20進(jìn)行動物試驗(yàn)的免疫毒理學(xué)評價時宜充分考慮到動物種屬對動物源性生物材料/醫(yī)療器械免疫反應(yīng)的敏感性和特異性。

三、免疫原性風(fēng)險相關(guān)的質(zhì)量控制

即使申報產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品免疫原性風(fēng)險具有可比性或免疫原性評價的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)充分，甚至已通過免疫毒理學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行了免疫原性的評價，注冊申請人也仍需進(jìn)行免疫原性風(fēng)險相關(guān)的質(zhì)量控制。免疫原性風(fēng)險相關(guān)的質(zhì)量控制用于保證產(chǎn)品免疫原性降低工藝的穩(wěn)定性，進(jìn)而保證產(chǎn)品在批量生產(chǎn)后免疫原性風(fēng)險持續(xù)可控。

建立免疫原性風(fēng)險相關(guān)的質(zhì)量控制，首先需建立能夠反映免疫原性降低工藝穩(wěn)定性的產(chǎn)品或中間品的性能指標(biāo)（因體內(nèi)試驗(yàn)不易操作且不易建立定量指標(biāo)，故一般為通過體外試驗(yàn)建立的性能指標(biāo)，如物理、化學(xué)指標(biāo)），然后通過對這些性能指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證和控制來實(shí)現(xiàn)對免疫原性降低工藝的穩(wěn)定性以及批量生產(chǎn)產(chǎn)品免疫原性的控制。

注冊申請人需結(jié)合動物取材組織中所含免疫原性物質(zhì)的種類和數(shù)量、生產(chǎn)工藝中對免疫原性物質(zhì)的處理方式、材料與人體接觸方式等情況具體選擇合適的控制方式。例如：對于通過提純?nèi)コ庖咴晕镔|(zhì)的膠原產(chǎn)品，可通過雜蛋白的含量指標(biāo)進(jìn)行控制；對于通過脫細(xì)胞工藝去除免疫原性物質(zhì)的產(chǎn)品，可通過殘留細(xì)胞數(shù)量、殘留DNA數(shù)量和/或殘留α-Gal抗原的數(shù)量等指標(biāo)進(jìn)行控制；對于通過交聯(lián)/固化方式使免疫原性物質(zhì)失活或使抗原表位隱藏的產(chǎn)品，可通過表征交聯(lián)/固化程度的指標(biāo)進(jìn)行控制。相關(guān)試驗(yàn)所涉及方法的國家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)部分已發(fā)布（如YY/T 0606.25），部分正在研究和制定中。無論是否有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，申請人均應(yīng)按照已經(jīng)過驗(yàn)證的方法進(jìn)行試驗(yàn)。

四、免疫原性相關(guān)不良事件

經(jīng)過了免疫原性的非臨床評價及相關(guān)的質(zhì)量控制之后，申請人還需在動物源性醫(yī)療器械的臨床試驗(yàn)和/或上市后的臨床應(yīng)用中進(jìn)一步關(guān)注與免疫反應(yīng)相關(guān)的不良事件。