2023年12月01日，國家藥監(jiān)局發(fā)布《體外診斷試劑穩(wěn)定性研究注冊審查指導(dǎo)原則（征求意見稿）》，本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)體外診斷試劑注冊申請人對體外診斷試劑穩(wěn)定性進(jìn)行充分的研究，并整理形成體外診斷試劑注冊申報(bào)資料，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報(bào)資料提供參考。

體外診斷試劑穩(wěn)定性研究注冊審查指導(dǎo)原則（征求意見稿）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對體外診斷試劑穩(wěn)定性進(jìn)行充分的研究，并整理形成注冊申報(bào)資料，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對體外診斷試劑穩(wěn)定性研究的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

體外診斷試劑（含校準(zhǔn)品、質(zhì)控品）在制造商規(guī)定條件內(nèi)（儲存、運(yùn)輸、使用等）保持其性能特性的能力稱之為穩(wěn)定性，通常使用時間、次數(shù)等進(jìn)行量化。本指導(dǎo)原則適用于體外診斷試劑以下研究類型：

（一）實(shí)時穩(wěn)定性

實(shí)時期穩(wěn)定性，也稱貨架穩(wěn)定性，用于確定產(chǎn)品的有效期。在制造商規(guī)定的儲存條件下、直至失效期的時間段內(nèi)，體外診斷試劑在其原始包裝內(nèi)應(yīng)保持其性能特性。

（二）使用穩(wěn)定性

使用穩(wěn)定性用于確定產(chǎn)品在投入使用后保持其性能特性的時間或次數(shù)等。申報(bào)產(chǎn)品可根據(jù)產(chǎn)品特性和使用情況提供不同類型的使用穩(wěn)定性聲明，如開瓶/開封穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性、機(jī)載穩(wěn)定性、凍融次數(shù)等。如涉及校準(zhǔn)品，還應(yīng)提交校準(zhǔn)頻率或校準(zhǔn)穩(wěn)定性研究。

（三）運(yùn)輸穩(wěn)定性

運(yùn)輸穩(wěn)定性用于驗(yàn)證運(yùn)輸過程中環(huán)境條件的變化對體外診斷試劑實(shí)時和使用穩(wěn)定性聲明的影響。

申請人可通過加速穩(wěn)定性研究、相似產(chǎn)品的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)探索性外推申報(bào)產(chǎn)品穩(wěn)定性，但說明書中穩(wěn)定性聲明應(yīng)基于醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的申報(bào)產(chǎn)品的真實(shí)測試數(shù)據(jù)。

本指導(dǎo)原則適用于體外診斷試劑產(chǎn)品注冊和變更注冊涉及的穩(wěn)定性研究，包括申報(bào)資料中的部分要求，其他未盡事宜，應(yīng)當(dāng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》等相關(guān)法規(guī)的要求。

二、注冊審查要點(diǎn)

（一）檢測用材料及樣本要求

1.待評價(jià)試劑要求

在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)上，應(yīng)采用符合醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的體外診斷試劑進(jìn)行穩(wěn)定性評價(jià)。申請人研發(fā)實(shí)驗(yàn)室配制試劑的穩(wěn)定性研究資料不作為注冊資料提交。

2.檢測系統(tǒng)要求

體外診斷試劑的檢測系統(tǒng)是指由樣本處理用產(chǎn)品、檢測試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、檢驗(yàn)設(shè)備等構(gòu)成的，可完成樣本從處理到最終結(jié)果報(bào)告所有階段的組合。穩(wěn)定性研究中檢測系統(tǒng)應(yīng)與說明書聲稱保持一致。除待評價(jià)試劑外，申請人應(yīng)明確檢測系統(tǒng)其他組成部分的基本信息，如產(chǎn)品/儀器名稱、規(guī)格和型號、批號、注冊人名稱、注冊證號/貨號等。這些配套材料應(yīng)盡可能限于單個批次，以避免批間變化對穩(wěn)定性評估的潛在影響。如研究過程中檢測系統(tǒng)其他部分發(fā)生變化，必要時，應(yīng)評估其對穩(wěn)定性研究的影響。

研究中機(jī)型應(yīng)選擇說明書聲稱適用機(jī)型之一。機(jī)載穩(wěn)定性應(yīng)選擇所有機(jī)型進(jìn)行真實(shí)機(jī)載研究，如不同機(jī)型間試劑倉設(shè)計(jì)、進(jìn)樣模式、溫濕度范圍等無差異，也可選擇代表性機(jī)型研究。

3.檢測樣本要求

模擬待測組分或基質(zhì)、質(zhì)控品等不能完全代表真實(shí)樣本屬性，穩(wěn)定性研究應(yīng)采用可穩(wěn)定保存的、與預(yù)期適用的樣本，優(yōu)先選用真實(shí)臨床樣本、真實(shí)樣本基質(zhì)或符合相關(guān)指導(dǎo)原則的企業(yè)參考品。對于難以長期穩(wěn)定保存或難以獲得等的樣本，可在不同時間點(diǎn)使用經(jīng)申請人定值的樣本，也可考慮模擬等方式代替，并提交合理依據(jù)。根據(jù)樣本適用性研究，對具有可比性的樣本類型，可選擇一種樣本類型進(jìn)行穩(wěn)定性評價(jià)；對于不具有可比性的樣本類型，應(yīng)對每種樣本類型分別進(jìn)行穩(wěn)定性評價(jià)。

檢測用樣本應(yīng)包含不同濃度水平，以確保聲稱測量區(qū)間內(nèi)檢測的穩(wěn)定性，一般應(yīng)包括低濃度、中濃度、高濃度、應(yīng)盡量包括醫(yī)學(xué)決定水平（如有）等。

（二）檢驗(yàn)批次

基于不同評價(jià)目的或研究類型，檢驗(yàn)所需最少批次也不同，基本要求如下：

1.實(shí)時穩(wěn)定性研究，需要3批試劑。

2.使用穩(wěn)定性研究，需要1批試劑。

3.運(yùn)輸穩(wěn)定性研究，需要1批試劑。

4.延長有效期聲稱，除需使用3批試劑進(jìn)行實(shí)時穩(wěn)定性研究外，還需使用1批試劑進(jìn)行使用穩(wěn)定性。

如產(chǎn)品存在不同包裝形式，應(yīng)詳細(xì)提交包裝材料、容器設(shè)計(jì)、密閉系統(tǒng)、裝量等圖文對比，如差異較大，應(yīng)分別進(jìn)行穩(wěn)定性評價(jià)。

對于其他特殊情況，申請人應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品特性、生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系研究、風(fēng)險(xiǎn)評估等資料，在上述最少所需批次、包裝形式的基礎(chǔ)上增加驗(yàn)證。

（三）評價(jià)指標(biāo)

申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性、產(chǎn)品設(shè)計(jì)輸入要求、相似產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究經(jīng)驗(yàn)，選擇能反映在儲存期間產(chǎn)品質(zhì)量、安全性或有效性潛在變化的指標(biāo)。定量檢測試劑建議至少包括檢出限、重復(fù)性、線性，定性檢測試劑建議至少包括陰陽性符合率、檢出限、重復(fù)性，校準(zhǔn)品質(zhì)控品建議進(jìn)行被測量漂移（被測量隨時間的變化）。應(yīng)明確評價(jià)指標(biāo)在每一時間點(diǎn)的重復(fù)次數(shù)。

評價(jià)指標(biāo)應(yīng)盡量設(shè)置為客觀、可量化指標(biāo)，如膠體金定性試劑，可設(shè)置基于色度評分的顏色變化指標(biāo)。

（四）驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)

基于二、（三）評價(jià)指標(biāo)的選擇，申請人應(yīng)在試驗(yàn)設(shè)計(jì)之初確定每項(xiàng)評價(jià)指標(biāo)的合理可接受標(biāo)準(zhǔn)，如最大容許漂移限值、置信區(qū)間、變異系數(shù)等。結(jié)合產(chǎn)品預(yù)期適用人群、受益/風(fēng)險(xiǎn)分析，申請人應(yīng)針對指標(biāo)設(shè)置的合理性提交依據(jù)。

（五）儲存條件

體外診斷試劑穩(wěn)定性受多種因素的影響，如溫度、濕度、光照等。申請人應(yīng)明確申報(bào)產(chǎn)品儲存條件具體范圍，如冷藏2～8℃，冷凍-20℃±5℃、開封后濕度60%～80%，機(jī)載溫度2～8℃等，并在聲稱“最差條件下”進(jìn)行整個時間段穩(wěn)定性研究。

溫度是穩(wěn)定性研究中的主要影響因素。對于儲存溫度范圍跨度較大的產(chǎn)品，應(yīng)考慮至少在上限和下限進(jìn)行試驗(yàn)。對于儲存溫度范圍較窄的產(chǎn)品，可在范圍內(nèi)單個溫度進(jìn)行試驗(yàn)，如2～8℃可選擇5℃。

對于開封后可儲存、需要復(fù)溶、反復(fù)凍融等的產(chǎn)品，應(yīng)根據(jù)具體情況對使用過程中涉及的條件（如溫度、濕度）和使用頻率設(shè)計(jì)相應(yīng)的穩(wěn)定性試驗(yàn)。

運(yùn)輸穩(wěn)定性應(yīng)充分考慮運(yùn)輸路線、交通工具、運(yùn)輸距離/時間、裝載模式、極端低溫/高溫、儲存后運(yùn)輸?shù)冗\(yùn)輸中可能遇到的各種條件；對于需要冷鏈運(yùn)輸?shù)漠a(chǎn)品，應(yīng)盡可能對產(chǎn)品脫冷鏈的溫度、次數(shù)、總時間等制定相應(yīng)要求。結(jié)合對實(shí)際運(yùn)輸條件和產(chǎn)品包裝的認(rèn)知及調(diào)查，申請人可設(shè)置多種環(huán)境因素及其序列變化來模擬產(chǎn)品可能遇到的“最差情況”，這些因素可能包括高溫、低溫、凍融循環(huán)、機(jī)械應(yīng)力（如跌落、振動、堆放）等。

（六）評價(jià)時間

實(shí)時穩(wěn)定性整個研究中至少設(shè)置四個時間點(diǎn)：開始（T0）、中間（Ti…）、聲稱時間點(diǎn)（TN）、超出聲稱時間點(diǎn)(TN+1)。開始時間點(diǎn)（T0）應(yīng)盡可能接近生產(chǎn)時間，超出聲稱時間點(diǎn)(TN+1)建議聲稱時間之后為聲稱時間之后10%至20%的時間范圍或其他合理范圍，為不確定性預(yù)留空間。在此基礎(chǔ)上，建議申請人合理增加若干中間時間點(diǎn)，以便識別早期漂移。

使用穩(wěn)定性應(yīng)根據(jù)實(shí)際使用情況、結(jié)合產(chǎn)品有效期，對開瓶、凍融等設(shè)置合理時間間隔。對于開瓶穩(wěn)定性較短的產(chǎn)品，建議取近效期末產(chǎn)品進(jìn)行開瓶穩(wěn)定性研究。

運(yùn)輸穩(wěn)定性應(yīng)將真實(shí)運(yùn)輸或模擬運(yùn)輸后保存至有效期末，運(yùn)輸開始時間盡量接近生產(chǎn)時間，以確定產(chǎn)品穩(wěn)定性聲明是否受到運(yùn)輸條件的影響。

（七）試驗(yàn)設(shè)計(jì)

大多數(shù)體外診斷試劑適用于經(jīng)典的穩(wěn)定性研究設(shè)計(jì)，即 研究開始時將產(chǎn)品置于儲存條件下，并在規(guī)定的時間點(diǎn)取出進(jìn)行試驗(yàn)，不同時間點(diǎn)結(jié)果與T0進(jìn)行比較。經(jīng)典穩(wěn)定性研究設(shè)計(jì)易帶入測量程序的長期變異，如樣本的不穩(wěn)定性、配套試劑批次變更、操作人員變動、儀器的維護(hù)或變更等，因此研究中應(yīng)注意盡量減少這類變異。

根據(jù)產(chǎn)品保存情況及凍融耐受度等條件，申請人也可在提交充分依據(jù)的基礎(chǔ)上選擇其他設(shè)計(jì)類型，如同步穩(wěn)定性研究設(shè)計(jì)或參比錨定實(shí)時研究設(shè)計(jì)等。

（八）試驗(yàn)方案

穩(wěn)定性結(jié)論應(yīng)在預(yù)先設(shè)計(jì)的方案所產(chǎn)生的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上獲得。研究開始前，申請人應(yīng)針對待測產(chǎn)品中所有組分（試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品）制定詳細(xì)試驗(yàn)方案。包括但不限于：研究內(nèi)容，實(shí)時穩(wěn)定性、凍融穩(wěn)定性、機(jī)載穩(wěn)定性等；產(chǎn)品名稱、包裝規(guī)格、批次；配套產(chǎn)品/儀器背景信息，如注冊證號/貨號、批號、儀器型號、注冊人名稱等；待測樣品信息，如樣本類型、來源、儲存條件等；試驗(yàn)設(shè)計(jì)；儲存條件，包括運(yùn)輸條件、使用條件等；評價(jià)指標(biāo)及驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)；檢驗(yàn)時間點(diǎn)及間隔；數(shù)據(jù)分析方法；及其他與穩(wěn)定性研究相關(guān)內(nèi)容。

（九）研究報(bào)告

穩(wěn)定性研究應(yīng)在建立合理的評價(jià)指標(biāo)和可接受的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上、根據(jù)實(shí)時研究數(shù)據(jù)，對不同評價(jià)指標(biāo)分別進(jìn)行分析，并對產(chǎn)品穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合評價(jià)。

1.穩(wěn)定性研究報(bào)告應(yīng)包括：遵循的研究方案；產(chǎn)品 /配套產(chǎn)品/待測樣本信息；原始研究數(shù)據(jù)，包括產(chǎn)品批次、樣本編號、具體溫度/濕度、實(shí)測數(shù)值等；數(shù)據(jù)分析和總結(jié)；結(jié)論等。

2.數(shù)據(jù)分析和總結(jié)

每個檢測樣本和每個批次產(chǎn)品在不同時間點(diǎn)采集的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)應(yīng)進(jìn)行趨勢分析。根據(jù)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)的不同，評價(jià)指標(biāo)應(yīng)選擇相應(yīng)的分析方法：對于半定量數(shù)據(jù)結(jié)果或不發(fā)生顯著變化的指標(biāo)，如顯色范圍不超過1個色度、pH7.5±0.1等，可直接根據(jù)原始數(shù)據(jù)明確是否符合驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，而無需進(jìn)行正式統(tǒng)計(jì)分析；對于試驗(yàn)結(jié)果隨時間發(fā)生變化或需進(jìn)行數(shù)據(jù)處理的指標(biāo)，如被測量漂移、精密度等，應(yīng)進(jìn)行離群值檢驗(yàn)、線性回歸分析、CV分析等。

3.結(jié)論

申請人應(yīng)明確產(chǎn)品的儲存條件、開瓶條件、凍融次數(shù)等，通過穩(wěn)定性研究結(jié)果的分析和綜合評估，明確產(chǎn)品穩(wěn)定性結(jié)論，并在說明書【儲存條件及有效期】項(xiàng)下簡要描述。當(dāng)不同生產(chǎn)批次所獲得的穩(wěn)定性持續(xù)時間不同時，有效期結(jié)論應(yīng)設(shè)為所有批次中的最短時間。

三、參考文獻(xiàn)

[1] 國家市場監(jiān)督管理總.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法:國家市場監(jiān)督管理總局令第48號[Z].

[2] 國家藥品監(jiān)督管理局.關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告:國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號 [Z].

[3] GB/T 29791.1-2013，體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息（標(biāo)示）第1部分：術(shù)語、定義和通用要求[S].

[4] CLSI. Evaluation of Stability of In Vitro Medical Laboratory Test Reagents. 2nd ed. CLSI guideline EP25. Clinical and Laboratory Standards Institute; 2023.

[5] YY/T 1579-2018, 體外診斷醫(yī)療器械體外診斷試劑穩(wěn)定性評價(jià)[S].